لوسیفراز
مسترمیکس سنتز cDNA
Back to products
مستر میکس qPCR هات‌استارت (2X)
مستر میکس qPCR هات‌استارت (2X)

کیت سنتز cDNA

کیت سنتز cDNA حاوی آنزیم Reverse Transcriptase، بافر، پرایمرهای Oligo (dT)18 و Random Hexamer، و dNTPs. مناسب برای سنتز cDNA از RNA، Real-Time PCR و تهیه کتابخانه cDNA.

کیت سنتز cDNA
Click to enlarge

• آنزیم Reverse Transcriptase خالص‌شده با فعالیت در دمای ۴۲ تا ۷۰ درجه سانتی‌گراد (بهینه در ۵۵ درجه).
• مناسب برای RNA با درصد GC بالا یا ساختارهای ثانویه پیچیده.
• حساسیت بالا برای رونوشت‌برداری از RNA ویروسی یا RNA با غلظت کم.
• حاوی RNase Inhibitor.
• بازدهی بالا و پایداری طولانی‌مدت در دمای ۲۰- درجه سانتی‌گراد.
• غیرفعال‌سازی آنزیم با حرارت دادن در دمای ۹۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۰ دقیقه.
• امکان استفاده از Oligo (dT)18، Random Hexamer یا پرایمرهای اختصاصی.

Reviews

There are no reviews yet.

Be the first to review “کیت سنتز cDNA”

Your email address will not be published. Required fields are marked *

one × two =

  • از ذوب و انجماد مکرر خودداری کنید
  • در ۲۰- درجه سانتی‌گراد و دور از نور نگهداری شود
  • بهترین زمان مصرف تا ۲۴ ماه پس از تاریخ تولید

استفاده از Oligo (dT)18 یا پرایمر اختصاصی:

  1. آماده‌سازی واکنش:
    • نمونه RNA و پرایمرها را روی یخ ذوب کنید.
    • مخلوط واکنش را به شرح زیر آماده کنید:
جزء حجم (میکرولیتر)
RNA الگو تا 1 میکروگرم
Oligo (dT)18 / پرایمر اختصاصی 1
بافر واکنش (5X) 4
آنزیم Reverse Transcriptase 0.5
dNTP Mixture 2
آب عاری از نوکلئاز تا حجم نهایی 20
  1. انکوباسیون:
    • مخلوط را به‌خوبی همگن کرده و در دمای ۵۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۶۰ دقیقه انکوبه کنید.
    • برای RNA با ساختارهای ثانویه پیچیده، دما را تا ۷۰ درجه سانتی‌گراد افزایش دهید.
  2. غیرفعال‌سازی آنزیم:
    • نمونه را در دمای ۹۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۰ دقیقه حرارت دهید.
  3. ذخیره‌سازی:
    • cDNA سنتز‌شده را در فریزر ۲۰- درجه سانتی‌گراد نگهداری کنید.

استفاده از Random Hexamer:

  1. آماده‌سازی واکنش اولیه:
    • نمونه RNA و Random Hexamer را روی یخ ذوب کنید.
    • مخلوط واکنش را به شرح زیر آماده کنید:
جزء حجم (میکرولیتر)
RNA الگو تا 1 میکروگرم
Random Hexamer 1
dNTP Mixture 2
آب عاری از نوکلئاز تا حجم نهایی 10
  1. انکوباسیون اولیه:
    • مخلوط را به‌خوبی همگن کرده و در دمای ۳۰ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۰ دقیقه انکوبه کنید.
    • بلافاصله نمونه را روی یخ قرار دهید.
  2. افزودن اجزای باقی‌مانده:
    • به مخلوط واکنش اضافه کنید:
      • 0.25 میکرولیتر آنزیم Reverse Transcriptase.
      • 4 میکرولیتر بافر واکنش (5X).
      • آب عاری از نوکلئاز تا حجم نهایی ۲۰ میکرولیتر.
  3. انکوباسیون نهایی:
    • مخلوط را در دمای ۵۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۶۰ دقیقه انکوبه کنید.
  4. غیرفعال‌سازی آنزیم:
    • نمونه را در دمای ۹۵ درجه سانتی‌گراد به مدت ۱۰ دقیقه حرارت دهید.
  5. ذخیره‌سازی:
    • cDNA سنتز‌شده را در فریزر ۲۰- درجه سانتی‌گراد نگهداری کنید.