مستر میکس پلیمراز Taq (قرمز) (2X)
یک مخلوط آماده PCR حاوی آنزیم Taq DNA Polymerase خالصشده، بافر بهینهشده، dNTPs و رنگ کرزول رد برای مشاهده اسیدهای نوکلئیک در طی الکتروفورز. مناسب برای کاربردهای مختلف PCR از جمله کلونینگ TA.
• حاوی آنزیم خالصشده با روشهای کروماتوگرافی متعدد.
• شامل تمامی مواد لازم برای انجام PCR (به جز نمونه و پرایمرها).
• بازدهی بالا و قابلیت تکرارپذیری عالی.
• سرعت و دقت بالا در انجام آزمایشات.
• فاقد آلودگی DNA باکتریایی.
• حاوی رنگ کرزول رد برای ردیابی حرکت اسیدهای نوکلئیک در الکتروفورز.
• مناسب برای کلونینگ TA به دلیل افزودن نوکلئوتید ۳’-A به انتهای محصول PCR.
- از ذوب و انجماد مکرر خودداری کنید
- در ۲۰- درجه سانتیگراد و دور از نور نگهداری شود
- بهترین زمان مصرف تا ۲۴ ماه پس از تاریخ تولید
- آمادهسازی واکنش:
- مخلوط اصلی، پرایمرها و نمونه را روی یخ ذوب کنید.
- مخلوط واکنش را به شرح زیر آماده کنید:
| جزء | حجم (میکرولیتر) | غلظت نهایی |
|---|---|---|
| پرایمر F (10 میکرومولار) | 0.5 | 0.2 میکرومولار (0.1 – 1.0 میکرومولار) |
| پرایمر R (10 میکرومولار) | 0.5 | 0.2 میکرومولار (0.1 – 1.0 میکرومولار) |
| مخلوط اصلی Taq DNA Polymerase (2X) | 12.5 | 1X |
| DNA الگو (ژنومیک، پلاسمید یا باکتریایی) | متغیر | 10 – 500 نانوگرم (ژنومیک)، 0.1 – 1 نانوگرم (پلاسمید)، 1 – 10 نانوگرم (باکتریایی) |
| آب درجه PCR | متغیر | – |
| حجم کل | 25 میکرولیتر | – |
- لولهها را به مدت 10 ثانیه سانتریفیوژ کنید قبل از قرار دادن در دستگاه PCR.
- شرایط سیکلینگ PCR:
| دما (°C) | مدت زمان | تعداد سیکلها |
|---|---|---|
| 95 | 2-5 دقیقه | 1 |
| 95 | 15 – 30 ثانیه | 30 – 35 |
| 50 – 65 | 20 – 30 ثانیه | 30 – 35 |
| 72 | 30 – 60 ثانیه | 30 – 35 |
| 72 | 5 دقیقه | 1 |
- توجه: دمای اتصال معمولاً 3-4 درجه سانتیگراد کمتر از Tm پرایمرها انتخاب میشود.
- مشاهده نتایج:
- محصولات PCR را با استفاده از الکتروفورز ژل آگارز بررسی کنید.
Reviews
There are no reviews yet.